兔肌動(dòng)蛋白,分子量:43kDa。普遍存在于各類細(xì)胞的細(xì)胞核中,是肌肉結(jié)構(gòu)蛋白的一種,肌原纖維細(xì)絲中的主要成分。它是由一條多肽鏈組成,分子構(gòu)型呈球形,有方向性,一般稱球狀肌動(dòng)蛋白(G-肌動(dòng)蛋白)。
兔肌動(dòng)蛋白(ActinFromRabbitMuscle)的產(chǎn)品詳情：
1.DNA帶模糊
1)DNA降解:避免核酸酶污染;
2)電泳緩沖液陳舊:電泳緩沖液多次使用后,離子強(qiáng)度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果。建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;
3)所用電泳條件不合適:電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過(guò)20V/cm,溫度<30℃;巨大DNA鏈電泳,溫度應(yīng)<15℃;核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力;
4)DNA上樣量過(guò)多:減少凝膠中DNA上樣量;
5)DNA樣含鹽過(guò)高:電泳前通過(guò)乙醇沉淀去除過(guò)多的鹽;
6)兔肌動(dòng)蛋白(ActinFromRabbitMuscle)有蛋白污染:電泳前酚抽提去除蛋白;
7)DNA變性:電泳前勿加熱,用20mMNaCl緩沖液稀釋DNA。
2.不規(guī)則DNA帶遷移
1)對(duì)于λ/HindIII片段cos位點(diǎn)復(fù)性電泳前于65℃加熱DNA5分鐘,然后在冰上冷卻5分鐘;
2)電泳條件不合適:電泳電壓不超過(guò)20V/cm;溫度<30℃;經(jīng)常更換電泳緩沖液;
3)DNA變性:以20mMNaClBuffer稀釋DNA,電泳前勿加熱。
3.帶弱或無(wú)DNA帶
1)DNA的上樣量不夠:兔肌動(dòng)蛋白(ActinFromRabbitMuscle)增加DNA的上樣量;聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高,上樣量可適當(dāng)降低;
2)DNA降解:避免DNA的核酸酶污染;
3)DNA走出凝膠:縮短電泳時(shí)間,;
4)對(duì)于EB染色的DNA,所用光源不合適:應(yīng)用短波長(zhǎng)(254nm)的紫外光源。
4.DNA帶缺失
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